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Matrix標準型含酚紅基質膠

簡要描述:Matrix標準型含酚紅基質膠本生生物公司供應:ELISA試劑盒,動物血清,熒光定量PCR耗材,移液器吸嘴,微量離心管,進口凍存管,細胞培養皿,培養板,培養瓶,進口吸頭,儀器及手套,色譜耗材,針頭過濾器等。

  • 產品型號:M10259
  • 產       地:天津市
  • 更新時間:2023-09-21
  • 訪  問  量:1066
詳細介紹
品牌其他品牌產地國產
級別化工級

  Matrix標準型含酚紅基質膠


  基底膜是動物體內上皮細胞基底面的一層基質膜。LYNJUNE®Matrix是從Engelbreth-Holm-Swarm(EHS) 小鼠腫瘤組織提取的基底膜成分,所形成的基質膠。該基質膠主要成分為laminin,collagen IV,heparan sulfate proteoglycans(Kleinman et al. 1986)。同時,該基質膠也包含多種生長因子,例如表皮生長因子EFG,血小板衍生生長因子PDGF,神經生長因子NGF,堿性成纖維細胞生長因子FGF-2,乙型轉化生長因子TGF-beta和胰島素樣生長因子ILGF(Vukicevic et al. 1992)。

  產品來源:

  Engelbreth-Holm-Swarm(EHS) 小鼠腫瘤基底膜成分

  產品儲存:

  建議您融化后先按照單次用量進行分裝,保存-20°C冰箱,有效期2年。

  產品性質:

  本品在4°C條件下為液態,但在加熱到37°C時呈凝膠狀態?;|膠凝固后,重新放回4°C過夜,基質膠可再次液化。

  注意事項:

  該基質膠在溫度高于10°C時就會開始凝固成膠,所以盡量在冰上操作基質膠。類器官傳代時,如果為了避免酶對類器官造成影響,可直接用4°C預冷的基礎培養基對基質膠進行緩慢吹打,即可將類器官從基質膠中釋放出來。

  產品應用:

  本品適用于類器官生長、分化、代謝和毒理學研究,體內和體外血管生成實驗。

  操作方法:

  一、腫瘤類器官藥敏實驗(操作所需時間為2小時)

  1.將擴增好足夠量的腫瘤類器官(實驗組)以及正常類器官(對照組)用4°C預冷的基礎培養基進行重懸,緩慢機械吹打,促進膠液化溶解,并保持類器官結構完整(可用于懸浮培養于有5%基質膠溶液的基質膠表面)(Guillen et al. 2022)?;蛘咄ㄟ^TryplE酶消化獲得單細胞懸液。

  2.離心收集類器官細胞,并進行細胞計數。

  3.加入LYNJUNE®基質膠原液,與細胞進行混勻。

  4.將細胞與膠的混合物,通過排槍加入37°C預熱過的96孔板,或者384孔板,立即將孔板放入培養箱。

  5.大約10min后,LYNJUNE®基質膠將凝固,加入相應體積的類器官培養液進行培養。

  6.類器官形成后(如果是機械吹打,類器官將在傳代24h后就會形成;如果是酶消化,類器官會在3-5天后形成),每個孔分別加入含有PI染料以及不同種類、不同濃度的待篩選的抗腫瘤藥物。

  7.用高內涵顯微鏡上進行活細胞成像,測定腫瘤類器官對各種藥物的敏感性。

  二、血管生成實驗(以永生化HUVEC細胞系為例,操作所需時間為1小時)

  1.將培養基換成饑餓細胞用培養基:加入含0.2% FBS,2mM L-gaxa,1mM丙酮酸鈉,100U/ml青ms和100µg/ml鏈ms的DMEM培養基培養24小時。

  2.將LYNJUNE®基質膠均勻鋪滿96孔板底。注意:槍頭需提前預冷半小時。盡量在冰上操作,避免基質膠過早固化,避免氣泡產生。

  3.將96孔板在細胞培養箱孵育30min,固化基質膠。

  4.消化HUVEC細胞,并計數。

  5.將200µL的HUVEC細胞懸液(含5X10^4個細胞)加于含基質膠的96孔板中。將96孔板放于培養箱。

  6.血管樣網絡結構將于3至12小時間形成。

  7.在血管網絡形成時,小心去除培養基,并用加入含活細胞染料1/1000 Calcein AM(綠色)的培養基進行染色,并用顯微鏡進行拍照記錄。

  三、神經軸突3D生長實驗(以大鼠胚胎神經干細胞為例,操作所需時間為2小時)

  1.取孕期12-15天的大鼠胚胎,用眼科剪和眼科分離出大腦皮層于4°C預冷的DMEM培養基中。

  2.用吸管輕緩吹打,然后用70µm濾網過來,獲得單細胞懸液,并進行細胞計數。

  3.離心(300g,3min),棄上清。將細胞與LYNJUNE®基質膠進行混合,然后將基質膠混合物滴加在24孔板中,每孔50µl。

  4.將24孔板放于培養箱,大約10min后,LYNJUNE®基質膠將凝固。加入1mL神經元分化培養基:Neurobasal medium,2% B27, 2mM L-glutamine,5%FBS,20ng/mL EGF和20ng/mL bFGF,100U/mL penicillin和100 µg/mL streptomycin。第二天開始,就能觀察到有明顯的神經軸突生長。

  5.在第7天可觀察到大量的神經突(Neurite)長出。

  

  僅 供 研 究 用 途 ,不 得 用 于 診 斷 或 治 療 程 序 。

  Matrix標準型含酚紅基質膠本生一直視質量控制為企業的生命,追求企業競爭力的不斷提升。公司在經營中始終秉承:遵紀守法,嚴于律己,寬仁以待,敢于承擔的企業精神作為標準,以過硬的質量和優良的服務來維護和拓展市場,較大限度的滿足客戶的需求。與客戶的共贏,是我們的發展目標。本生!您信任的合作伙伴。我們愿與您真誠合作,共創美好的未來。

 


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