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ELISA檢測中TGF-β1樣本處理方法簡介

更新時間:2023-06-06    點擊次數:1530

  ELISA檢測中TGF-β1樣本處理方法簡介


  近段時間以來,很多客戶來電詢問關于TGF-β1樣本的處理方法,為了更好的讓客戶了解整個過程,BUNSEN本生整理以供參考。

  由于機體內表達的 TGF-β1是無活性同型二聚體的前體分子,在機體外,無活性的TGF-β1又稱為latency associated peptide (LAP),在酸性條件下進行預處理即可獲得有活性的TGF-β1,從而用于ELISA檢測。

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  TGF-β1血清、血漿樣本的活化處理步驟

  1、 取40 μL樣本,加入2 mL EP管或者西林瓶中。

  2、 加入20 μL 1N HCl于渦旋儀上混合均勻,室溫靜置10 min

  3、 加入20 μL 1N NaOH, 混勻。

  4、 根據樣本實際情況,對樣本進行適當稀釋后進行檢測。

  注:樣本測值計算時應乘以總體稀釋倍數(含活化稀釋和活化后稀釋)

  TGF-β1細胞上清/尿液樣本的活化處理步驟

  1、 取100 μL細胞培養上清或尿液, 加入20 μL 1N HCl于渦旋儀上混合均勻

  2、 室溫靜置10 min

  3、 加入20 μL 1N NaOH, 混勻后即可進行檢測

  提醒:以上兩個步驟中活化了的樣本需在2h內完成檢測才能保證實驗結果的準確性。細胞培養基中的動物血清可能含有一定濃度的TGF-β1,因此在檢測細胞培養上清時,盡量選擇不含有動物血清的細胞培養基。如若使用了含有動物血清的細胞培養基,務必將細胞培養基作為對照進行檢測,確定培養基中TGF-β1的濃度,最終在計算細胞培養上清中的TGF-β1濃度時減去培養基中TGF-β1的濃度方為實際樣本濃度

  活化試劑的配制:

  1、 1 N HCl (100mL): 將 8.33mL 的 12M HCl緩慢加入到 91.67mL 的去離子水中,混合均勻后即可使用。

  2、 1N NaOH/0.5M HEPES (100mL):將 10mL濃度為10M NaOH加入80mL的去離子水中,混合均勻后再加入 11.9g 的 HEPES,混勻,用去離子水定容至100mL備用.

  TGF-β1血清 本生一直視質量控制為企業的生命,追求企業競爭力的不斷提升。公司在經營中始終秉承:遵紀守法,嚴于律己,寬仁以待,敢于承擔的企業精神作為標準,以過硬的質量和優良的服務來維護和拓展市場,較大限度的滿足客戶的需求。與客戶的共贏,是我們的發展目標。本生!您信任的合作伙伴。我們愿與您真誠合作,共創美好的未來。


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