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對于血清知識點,圍觀的看過來!

更新時間:2023-05-11    點擊次數:870

  對于血清知識點,圍觀的看過來!

  由于血清來源于動物,且含有細胞培養中所需要的各種營養(血漿蛋白、多肽、脂肪、碳水化合物、生長因子、激素、無機物等),這奠定了血清是細胞培養實驗中的試劑的基礎。

  目前血清的采集地主要分布在以下國家:

  市面上的牛血清產品名稱雖然對較多,但根據其不同的特性,大致可以分為以下四種。根據牛的取血年齡可以區分:

  胎牛血清

  胎牛血清(Foetal Bovine Serum,簡稱FBS)指的是取自未出生,母牛剖腹心臟穿刺采血得來的血清。

  國產胎牛血清

  國產胎牛血清(并無明確定義,但通常用此命名)指的是出生4-6小時,且未進行哺乳(unsuckled)進食的新生牛,有時還稱作國產新生牛血清。

  新生牛血清

  新生牛血清(Newborn Calf Serum,簡稱NBCS,或稱小牛血清)指的是出生14天-3個月進行取血的牛血清。

  成年牛血清

  成年牛血清(Adult Bovine Serum,簡稱ABS)指的是取血時牛齡通常超過12個月的牛血清。

  以上取血牛齡的差異主要是受當地國家畜牧業的發展及法規限制影響,因為牛血多為畜牧業副產業,并未有專門為取血而養的牛。

胎牛血清 天津本生

  幾種血清的比較:

  


  這幾種不同牛齡血清所含的促細胞生長因子、促貼附因子、激素及其他活性物質等組分與比例不同。常規來說,年齡越小的牛血清,細胞培養效果越好。

  胎牛血清培養效果好于新生牛,且因為胎牛未進食過母乳,所以IgG含量低。故目前多數實驗人員選擇的都是胎牛血清進行細胞培養。

  胎牛血清成分已知的有上千多種,以下為主要成分表:

  


  以下是BUNSEN本生技術小編為您總結的血清相關的知識點:

  1、血清的顏色如何?

  為何有的胎牛血清顏色偏紅,而有的偏黃?是因為胎牛血清顏色是由血紅蛋白(鮮紅)和膽紅素(黃)決定的,主要是受血紅蛋白影響。

  血紅蛋白含量很低時,含少量膽紅素,呈淡黃或金黃。血紅蛋白含量高時,會呈現淡紅色。

  需要長期保存的血清必須儲存于-20℃冰箱(未開封血清有效期為5年)。若存放于4℃,請勿超過1個月,若一次無法用完一瓶,建議將血清無菌分裝并冷凍。

  2、血清如何解凍?

  血清解凍需采用逐步解凍法:將血清從-20℃冰箱放入4℃冰箱中溶解一天,然后移入室溫,待全部溶解后再分裝。在溶解過程中需不斷

  輕輕搖晃均勻(小心勿造成氣泡),減少沉淀生成。切勿直接將血清從-20℃轉入37℃解凍,這樣因溫差較大易造成蛋白質凝結并出現沉淀。

  3、使用前是否需要過濾?

  本公司血清在ISO 13485認證的廠房中生產,經過3次0.1 μm過濾,出廠經過檢測并且會使用三種以上的細胞株進行培養測試及無菌檢測,污染幾率非常非常非常低(重要的事情說三遍)。通常細胞污染有非常多的可能性,根據協助使用者進行分析檢測,結果表明絕大部分都是因人為操作失誤導致污染。因此買來的血清不需要再次進行過濾。

  4、為什么血清中會有沉淀生成,主要成分是什么,會對實驗有什么影響?

  血清中沉淀主要有:纖維蛋白(絮狀沉淀),胎球蛋白,脂蛋白,冷凝集素,玻連蛋白,磷酸鈣(顯微鏡下小黑點沉淀),膽固醇等。

  原因:造成沉淀的主要原因是溫度的改變。熱滅活,反復凍融,長期儲存于2-8℃或者室溫。

  預防:非必要,不用熱滅活;避免反復凍融;-20℃保存;4℃全融(期間間斷搖晃均勻);2000 rpm離心5分鐘(不建議用0.2 μm濾膜過濾),取上清使用。

  5、黑膠蟲是來源于血清嗎?

  目前科學界對黑膠蟲的身份并無定論, 通常是顯微鏡下觀察到密密麻麻的小黑點在培養基中自主游動,就稱為黑膠蟲污染。

  黑膠蟲在鏡下的典型特征呈卵圓狀、球狀、桿狀等,可引起細胞生長遲緩或裂解凋亡。

  目前沒有充分的數據表明黑膠蟲來源于血清,因為其尺寸遠大于血清過濾時所用的0.1微米(μm)濾膜。建議各位老師通過使用三抗(Cat#: C3422-0100)外加支原體處理試劑(Cat#: 03-038-1B)嘗試殺滅黑膠蟲。

  6、血清存在批間差嗎?

  答案是毋庸置疑的,因為血清來源于動物,其組成成分有1000種左右,且血清組成及含量常隨供血動物的性別、年齡、生理條件和營養

  條件不同而異。每個批號的組分和百分比含量都是不固定的,所以批間差異是存在的。

  建議先進行批號測試,篩選出合適批號,購買半年甚至一年以上的用量,避免批間差造成實驗波動(胎牛血清在-20℃保存可達5年)。

  Tips:

  1、如果要除去血清中的沉淀,可以將血清分裝至無菌離心管中,400g 離心,留上清即可。由于濾膜容易被沉淀堵塞,因此不建議用過濾的方法。

  2、沉淀不是檢驗血清的硬指標,但為了實驗準確、實驗美觀、實驗便利,還是應該盡量減少沉淀的產生。掌握正確的血清解凍、使用方法,再加上一款品質穩定的優秀血清,對于細胞實驗來說,至關重要。

  對于血清知識點,圍觀的看過來! 本生生物公司供應:ELISA試劑盒,動物血清,熒光定量PCR耗材,移液器吸嘴,微量離心管,進口凍存管,細胞培養皿,培養板,培養瓶,進口吸頭,儀器及手套,色譜耗材,針頭過濾器等。


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